12ª PRÁCTICA

21/02/2020
PRÁCTICA Nº12: "DETERMINACIÓN DEL PORCENTAJE DE RETICULOCITOS (RET)"

OBJETIVOS

• Determinar el RET por un número determinado de hematíes.
• Calcular el número de reticulocitos existentes por volumen de sangre.
• Valorar el RET, el número absoluto de reticulocitos y de la actividad eritropoyética.

MATERIAL NECESARIO

• Lanceta.
• Alcohol 70º.
• Tubo de ensayo de 3 mL.
• Gradilla.
• Papel Parafilm.
• 2 portaobjetos.
• Pipetas Pasteur desechables.
• Aceite de inmersión.
  

APARATO

• Microscopio óptico.

REACTIVOS

• Colorante de azul de cresil brillante preparado de la siguiente manera:
• 1 volumen de citrato sódico (20 mL).
• 80 mL de Suero Fisiológico.
• 1 gramo de azul de cresil brillante.

• Disolver el colorante en la mezcla anterior, guardarlo en una botella de cristal topacio para que no se vea afectado por la luz, y filtrarlo antes de usarlo.

MUESTRA

• Sangre capilar.

PROCEDIMIENTO

1. Colocar en un tubo 3 gotas de solución de colorante con una pipeta Pasteur.
   
   
   
2. Añadir 3 gotas de muestra sanguínea capilar con la ayuda de una pipeta Pasteur.
   Nota: La mezcla siempre debe ser proporcional 1:1 (la misma cantidad de colorante que de muestra).
   
   
   
   
   
   
   
3. Tapar el tubo con papel Parafilm y mezclar la solución dando pequeños golpecitos con el tubo de ensayo sobre la mesa para que los eritrocitos absorban bien el colorante.
   
4. Dejar en reposo a temperatura ambiente durante 20 minutos.
5. Una vez transcurrido este tiempo, volver a homogeneizar la suspensión.
6. Destapar el tubo y con una gota de la mezcla, realizar una extensión por el método de la cuña sobre un portaobjetos.
   
   
   
   
   
   
   
   
   
7. Dejar secar la extensión al aire.
8. Colocar la extensión una vez bien seca sobre la platina del microscopio y proceder a la visualización y localización de reticulocitos.
9. Con el objetivo de 40x localizar una zona de la extensión en que los hematíes se observen bien separados.
   
10. Pasar al objetivo de 100x (con ayuda de aceite de inmersión) y ajustar la luminosidad para observar bien las células.
11. Hacer un recorrido de diferentes campos sobre la extensión en forma de almena hasta llegar a observar varios reticulocitos.

RESULTADOS